鐵是動(dòng)物、植物和微生物生長(cháng)的重要元素,該元素 作為多種酶 的 活 性 中 心 并 且 參 與 了 呼 吸、基 因 調 控、 DNA 合成、氧氣運輸等多個(gè)生物過(guò)程。與大多數生 物體一樣,結核分枝桿菌也需要鐵元素作為酶輔助因 子來(lái)參與多種生物過(guò)程。鑒于鐵元素對結核分枝桿菌的重要性,因此,本研 究以牛結核分枝桿菌 BfrB蛋白為研究對象,通過(guò)對牛 結核分枝桿菌 BfrB蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)預測分析、表 達純化及多克隆抗體的制備。PCR 儀購自杭州柏恒科技有限 公司;恒溫細菌培養箱購自上海精宏實(shí)驗設備有限公 司;恒溫水浴鍋購自沙鷹科學(xué)(上海)儀器有限公司;恒 溫水平搖床購自上海智城分析儀器制造有限公司;核 酸電泳儀購自北京六一生物科技有限公司。
在人結核分枝桿菌中,BfrB蛋白已被證明在鐵元 素的儲存、維 持 鐵 穩 態(tài)、致病性等方面發(fā)揮了重要作 用。以 牛 結 核 分 枝 桿 菌 BfrB 蛋 白 為 研究對象,對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析、克隆表達及多克 隆抗體的制備。BfrB蛋白由181個(gè)氨基酸組成,是一 種親水性的非分泌蛋白,無(wú)跨膜結構域、信號肽。研究表明,固有無(wú) 序 蛋 白 與 病 原 菌 的 致 病 性 密 切 相 關(guān)。